Pharmaceutical Technology 37 SUPLEMENTO LIQUIDOS 2025 Se requiere un conocimiento detallado de la biosíntesis de glicanos para interpretar completamente los datos y definir las estructuras de glicanos que estos indican. Peso o tamaño molecular Los instrumentos modernos de MS presentan una alta precisión y resolución de masa, lo que permite una evaluación precisa del peso molecular del producto intacto y la heterogeneidad asociada (bajas ppm). No solo proporciona datos relacionados con el tamaño de la molécula, sino que también puede proporcionar datos ortogonales que respaldan otras evaluaciones primarias de características moleculares clave, lo que incluye modificaciones postraduccionales. El análisis en diversas condiciones (p. ej., nativa [Figura 4], reducida o post-desglicosilación) permite evaluar la masa total del producto, así como las cadenas proteicas individuales en especies multiméricas y cadenas proteicas en ausencia de heterogeneidad de glicanos. Los datos de MS deben utilizarse junto con los datos de métodos más tradicionales, como Figura 4: Peso molecular intacto de una muestra de Herceptin (trastuzumab). Se realizó una cromatografía líquidaespectrometría de masas (LC-MS) en línea de la muestra, seguida de la transformación de los datos de masa brutos para generar los valores de masa intactos. Las diferencias de masa observadas entre las señales principales son consistentes con los distintos niveles de galactosa en los N-glicanos. Las señales menores indican la existencia de otras fuentes de heterogeneidad en la muestra, que pueden investigarse con más detalle.
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