Pharmaceutical Technology Ed. 162

Pharmaceutical Techno logy 45 Edición Sudamérica 2019 - N º162 se encontraron diferencias estadística- mente significativas en UFC/m 3 entre filtros de prueba y filtros de referencia, y sin diferencias en la flora microbiológica entre filtros de prueba y de referencia las poblaciones de UFC fueron similares. El muestreo de aire continuo por ocho horas en filtros de gelatina con el sistema MD8 Airscan® no afectó la recuperación total ni cambió la diver- sidad de microorganismos recuperados al comparar los filtros prueba con los filtros de referencia. La verificación de la contaminación microbiológica del aire en las áreas de producción es de gran importancia porque el llenado aséptico es el paso en el proceso de producción de la industria farmacéutica que alberga uno de los mayores riesgos de contaminación 2 . Las líneas de llenado aséptico se utilizan cada vez más en la industria farmacéutica porque un número cre- ciente de productos biotecnológicos no puede ser esterilizado después de la producción sin que el proceso de esterilización afecte su calidad. Las líneas de llenado se definen como ISO 5 1 y aire muestreado activamente en estos entornos debe tener menos de una unidade formadora de colonias por metro cúbico (UFC/m 3 ), con un mínimo volumen de muestra de un m 3 de aire tomado por ubicación de muestra, de acuerdo con el Anexo 1 de la guía GMP de la UE. Considerando un turno de trabajo de ocho horas, un m 3 puede ser un volumen de muestra demasiado bajo para juzgar confiablemente la calidad del aire del entorno de fabricación. Por lo tanto, el desarrollo de un monitoreo continuo en la producción es una herramienta para minimizar los riesgos de contaminación y cubrir de forma total los requisitos del estándar de control de calidad. Se necesita un método, que permita examinar conti- nuamente todos los ciclos del proceso de producción y que permita el mues- treo en múltiples puntos. Para determinar si el muestreo conti- nuo de aire con membranas de gelatina puede monitorear efectivamente todo el proceso de producción durante un turno de ocho horas, la viabilidad de los microorganismos en los filtros gelatina durante el monitoreo de aire estéril a largo plazo, es decir, se examinó si los organismos atrapado pueden soportar el estrés y si el rendimiento de recupe- ración no se ve alterado por el secado a largo plazo. Las pruebas anteriores mostraron que los filtros de gelatina con una velocidad de entrada de 0.25 m/s tuvieron tasas de retención promedio de 99.9995% para esporas Bacillus subtilis var.niger y 99.94% para los colífagos T35. Materiales y métodos El estudio examinó si la viabilidad de los microorganismos en los filtros de gelatina se mantuvo durante el análisis por filtración a largo plazo. La expresión “aire filtrado” describe la área clase ISO 5 que incluye el aire filtrado con filtros HEPA del gabinete de seguridad biológica Clase 2. Los filtros de gelatina de prueba y referencia se expusieron por primera vez a aire no estéril por 30 minutos. Los muestreadores de aire MD8 Airscan® (set con un caudal de aire de 2,0 m 3 /h [0,144 m/s]) en un entorno de labora- torio no controlado (sala de autoclave) aprox. 30-40 cm separados el uno del otro. Esta ubicación de muestreo fue elegida para construir un medio am- biente con condiciones especiales, una humedad relativa más alta (~57 ± 6% y temperatura: ~21 ± 1°C) se espera una cantidad mayor de microorganismos sensibles al estrés, transmitidos por el agua (p. ej. Gram negativos, generando el escenario del “peor de los casos”). Además, se espera un mayor contenido general de microorganismos en el aire por metro cúbico en el laboratorio. Por eso, se postuló que las siguientes ocho horas de estrés por secado muestran un efecto claramente visible y estadística- mente detectable. A continuación, los filtros de prueba se usaron para tomar muestras de aire filtrado para un período adicional de ocho horas. Para la filtración de aire graduado ISO 5, el muestreo se realizó con el MD8 Airscan®, las unidades de monitoreo se colocaron debajo de una campana de flujo laminar (humedad relativa: ~43 ± 3% y temperatura: ~23 ± 1°C), por lo tanto, no hubo alta humedad relativa adicional durante el estrés de ocho horas. Los filtros de referencia fueron some- tidos a un solo 30 minutos de filtración de aire no estéril sin aireación adicional. Ellos fueron puestos en poroto de soja - caseína - digerir agar mediano directo después de muestreo. Al final de la prueba del período de filtración de ocho horas debajo de la FIGURA 1 Comparación de la UFC media en los filtros de prueba y gelatina de referencia 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Test Ref FIGURA 2 Comparación de CFU en la prueba emparejada y los filtros de gelatina de referencia 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Test Ref